细胞培养小知识-常用培养基有哪些？如何配制？
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为了维持细胞的生长和分裂，我们需要为它们提供适当的生长环境，这通常涉及到使用特定的培养基。以下是几种常用的细胞培养基。 一、MEM（Minimum Essential Medium） MEM是一种广泛使用的培养基，适用于多种类型的细胞。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素，成分简单。是最低必需培养基，主要是贴壁细胞的培养，修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙（Ca）MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。 二、DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium） DMEM是一种常用的培养基，特别适用于贴壁细胞的培养。与MEM相比，它含有更多的添加剂和支持介质。同时又分为高糖型（4500mg/L）和低糖型(1000mg/L)。而MEM中葡萄糖含量1000mg/L。DMEM-高糖型适合生长较快、附着性较差的肿瘤细胞，克隆细胞，也可用于DNA转染的转化细胞的培养；高糖型使细胞生长过快，不利于融合细胞的染色体稳定，做单抗细胞融合时，一般使用低糖型，DMEM-低糖型主要用于干细胞的培养。 三、DMEM/F12培养基 是两种独立的培养基，后来被混合在一起，形成了一种全面支持各种细胞生长的培养基。DMEM（杜克大学 Eagle's Minimum Essential Medium）由美国杜克大学的Eagle博士开发，是一种低盐、低钙、含有必需氨基酸和维生素的培养基，特别适合贴壁细胞的培养。F12（Ham's F-12 Medium）则是由ATCC的Ham博士开发，含有更接近生理状态的营养成分，如微量元素、维生素和生长因子等，特别适合一些特定类型细胞的生长。将这两种培养基结合，形成DMEM/F12培养基，能够提供细胞所需的丰富营养，支持多种类型细胞的生长。它既适合贴壁细胞的培养，也适用于悬浮细胞的生长。例如，一些肿瘤细胞、干细胞、胰腺细胞等都可以在DMEM/F12培养基中良好生长。 四、 RPMI 1640培养基： 最初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备。开始的配方适合悬浮细胞的生长，主要针对淋巴细胞，后经几次改良从RPMI 1630,1634而至1640，其成分较为简单。现发现它适应于多种类型细胞的生长，包括肿瘤细胞以及很多正常组织细胞体外培养。
培养液的配置方法大致相同，如下：
1.取一袋干粉培养基，将干粉培养基溶于欲配制液体总量2/3的三蒸水，冲洗包装袋2次倒入培养液中，加入磁性搅拌棒并置于磁力搅拌器上充分搅拌，确保培养基干粉充分溶解。 2.按照产品说明的要求和实验需要补加NaHCO3。 3.调整培养液pH值，用pH计或pH精密试纸观察调整结果达到pH7.2-7.4。 4.将上述溶液用一次性滤器，0.22um微孔滤膜过滤除菌。 5.将过滤除菌的培养液分装于无菌容量瓶中，标好标签，加盖瓶塞，密封，4℃冰箱存放。
注意： 1. 培养液配制后，取适量培养液到小的培养皿里，放入培养箱，进行无菌实验，培养72小时后观察培养基是否浑浊或者有菌落生成。 2.每批次配制液体数量以使用2周左右为宜，以免时间过长造成营养成分损失。 本文来自
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