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掌握样本处理,开启成功实验之门

你是否曾在实验中遇到样本处理的难题?是否因为样本处理不当而导致实验失败?别担心,今天我们将为你揭开样本处理的神秘面纱,带你开启成功实验之门!

一、细胞样本

  1. 细胞块石蜡切片

对于细胞量较多的样品,可离心分离后用中性甲醛固定,制作琼脂细胞块,然后按照石蜡切片操作流程进行。

  1. 细胞爬片

孔板里的爬片取出后,用 PBS 洗涤 2 次,4%多聚甲醛 4℃固定 15 分钟,吹干表面液体后置于-20℃保存。若短期内进行实验,可在固定后于 4℃放置。根据研究目的,PBS 洗涤可选择不做,如 TUNEL 染色检测凋亡时。

  1. 细胞涂片

常用的固定液有 95%酒精、酒精-冰醋酸液、乙醚-酒精液和 Carney’s 液等,其中 95%酒精较为常用。

二 组织样本

1石蜡切片

1.1 取材要求

  • 组织固定应尽快进行,最好在组织离体后的 15 分钟内完成。

  • 组织标本不宜过大,以免固定液渗透不足。

1.2 固定要求

  • 固定液选择:10%福尔马林(4%甲醛)或 10%中性甲醛适用于常规病理切片染色和免疫组织化学。

  • 固定液用量:一般与组织体积比为 10:1~20:1。

  • 组织固定时间:应适中,过短或过长都会影响固定效果。

1.3 切片保存

  • 烤片后可在 4℃保存,若长期保存则需置于-20℃。


  1. 冰冻切片

2.1 取材要求

组织应立即置于超低温冰箱或液氮中保存。

2.2 固定要求

切片后应立即放入甲醇、95%酒精、丙酮、4%多聚甲醛等固定液中。

2.3 切片保存

固定好的切片自然风干后,可密封并存放在-80℃或-20℃,但应尽快用于后续实验。

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