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超净台里的酒精灯，发挥什么作用？

2023-7-19 17:28:33

关于超净工作台里有没有必要用酒精灯，一直是许多科研者谈论的火热话题之一。

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部分人认为超净工作台里不需要放置酒精灯，大致会有如下一些观点：

现在绝大多数细胞培养使用的试剂瓶子，都是塑料制品，经不起灼烧，短暂的过火达不到高温，肯定没有局部消毒的效果，更别说灭菌了；

超净台内的气流本来就应该是无菌的，酒精灯的热气流会干扰通风的流动，反而影响超净台本身的层流除菌除尘效果；

所谓酒精灯周围是无菌区，是在没有超净台的时候，灼烧能产生上升气流，防止灰尘落入瓶口，但有超净台的时候就没有必要；

在正常情况下，快速操作比在酒精灯附近无菌区磨蹭效果更佳；

使用酒精灯增加了火灾的隐患；

某些有留学经历的，表示在美国细胞培养超净台里是没有酒精灯的；

无菌操作才是细胞培养的根本，而不是酒精灯提供的这点作用；

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但无论说一千道一万，

事实是国内绝大多数超净工作台里，

依然配有酒精灯。

少部分没有配置的，

最主要原因是考虑明火安全问题。

或者就是自己认错了台子，

没有分清楚生物安全柜和普通超净工作台。

生物安全柜是不需要也不可以放置明火酒精灯的。

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那么究竟超净台里配置酒精灯，是否多此一举？

回答这个问题之前，我想先举例外科手术室做类比：

轮转过外科的医学生，想必都对手术室的无菌条件和强调无菌意识的重要性印象深刻。

不论是普通消毒手术室，还是现代高级的层流手术室，都是一样强调无菌意识。

尽管手术室内使用紫外线消毒、手术台铺了很多无菌单，对双手依旧要求“上不过肩、下不及腰”。

尽管需要身穿无菌衣、戴无菌手套，对手卫生的洗手、消毒流程一样必不可少。

操作动作讲究柔和、有序进行，而不是一惊一乍、噼里啪啦。

要是你胆敢用戴着无菌手套的手去挠戴着无菌帽子的头，小心主任锤爆你的头！

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这些动作和行业规范，是为了不论是从理论上，还是从实际上尽最大程度地达到无菌条件。

国内超净工作台里放置酒精灯，就是在细胞培养过程中不论是从理论上，还是实际上的一种更高无菌条件的保证！

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理由如下：

无菌是分等级的，超净工作台一般可以达到局部百级，也就是指1立方米空气中的5微米以上的尘埃数不超过100，也不是完全无菌无尘，且紫外线台内不能100%的消灭微生物。而酒精灯周围10cm处可以形成一个天然无菌区，是对局部无菌环境的更进一步保障。

酒精灯有上升气流，可以使其附近大约10cm处的范围内，没有灰尘落下，开启的瓶盖放置在此区域，就算是暴露状态下，也不用太担心灰尘掉落的问题。

细胞培养的试剂，都不是一次就用完的，需要放置在非无菌环境的冰箱里保存，这过程难免会导致瓶身、瓶口附近附着细菌、灰尘。尽管带入超净台内都会用酒精喷洒，但酒精仍然无法完全灭菌和除尘。其实细菌自己是不会跑的（跑得太慢了），所以细菌的移动不是随着气流，就随着液流，我们适当灼烧瓶口等有液流的地方，使其干燥，就产生了相当于“局部固定”细菌或灰尘的作用，就减少了它们随液流扩散的可能性。

细胞培养过程，难免有些液体是用倾倒的方式丢弃，这时瓶口的残留流动液体就增加了污染的可能性，酒精灯可以使其干燥，原理同上。

一些原代细胞操作时，会用到一些金属器械，虽然我们是高压灭菌后才使用的，但是往往一次实验里，需要夹取不同部位和组织，间隔期间用酒精灼烧金属器械，可以干燥或者达到灭菌效果。

很多单位超净工作台，并没有定期检查维护（达不到国外发达国家的条件），最多也就是定期更换滤网，但是否更换滤网之前，其除菌除尘效果已经早就不达标了也不得知，此时在关键操作环节置于酒精灯附近操作，是更有保障的。

超净台内的酒精灯是不会影响超净台的层流除菌除尘效果的，酒精灯局部的气流范围本身是无菌无尘的，那些看不见的被酒精灯“赶跑”的细菌灰尘，会进入附近超净台提供的层流里，被排出工作台外。

关于安全问题，酒精灯虽然是明火，正确使用下已经算是很安全的了。不要在酒精瓶身、手套沾有未干的酒精情况下去点灯；不要使酒精灯瓶内的酒精过多或过少；不要使酒精灯倾倒；不要加热易燃易爆炸物品。注意这些细节基本不会有问题，比家庭使用煤气罐安全多了。

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简单来说：

酒精灯提供了明火，

除了一些干燥、高温的独特作用外，

其周围大约10-15cm范围内，

可以形成一个无菌区域，

此范围下方的超净台面，

也不会有灰尘落下。

我一般会把开启的瓶盖放在酒精灯周围大约10cm这个范围内进行保护，一些关键的操作环节，会在此酒精灯附近进行，其余部分和没有酒精灯一样正常

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