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TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒是一个完整的细胞裂解物系统，可直接利用培养细胞进行基因表达分析，而无需 RNA 纯化步骤。其仅通过五个组分就可实现灵敏快速的反转录定量聚合酶链反应 (RT-qPCR)：Express 裂解缓冲液、Express ezDNase 酶、Express 反转录预混液、反转录对照和赛默飞一流的 TaqMan Fast Advanced 预混液。TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒能够以快速的工作流程提供您所需的灵敏度：约 70 分钟即可获得基因表达分析所需的 RT-qPCR 结果。 TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒具有下列特点： • 简单快速——短短 5 分钟内制备 RT-qPCR 所需的 96 份样品 • 无需繁琐的 RNA 纯化步骤——无需使用离心柱、加热或离心 • 工作流程经过验证——全套试剂经过优化，开箱即可高效工作 • 环保——试剂盒符合 REACH 法规，减少组分和所需的移液步骤，降低塑料成本 • 试剂盒大小适合自动化操作——包含裂解和反转录组分，可进行 2,500 次反应 化学试剂经过优化，无需添加终止液 赛默飞 TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒简化了通过直接细胞裂解进行的基因表达分析。赛默飞 Express 试剂盒只需一个细胞裂解步骤，无需添加终止液，也能灵敏快速地提供准确且可再现的结果。使用 Express 裂解液可裂解 10-100,000 个细胞。您可将 ezDNase 酶添加至 Express 裂解液中，以便在细胞裂解过程中去除基因组 DNA。室温下培养 5 分钟后，使用 SuperScript IV VILO 预混液将裂解物直接用于反转录。反转录反应完成后，使用 TaqMan Fast Advanced 预混液和 TaqMan 基因表达检测试剂盒进行 qPCR 分析。 工作流程精简，能够灵敏快速地提供准确结果 采用 TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒制备 RNA，能够大大加快和简化基因表达分析。细胞裂解物的灵敏度和特异性优于或相当于使用传统离心柱分离法提取的 RNA。在短短五分钟内，裂解程序可为 RT-qPCR 制备细胞裂解物，同时去除基因组 DNA。因为裂解程序完全在室温下进行，因此可通过自动化平台轻松实现自动化操作，用于 96 孔板或 384 孔板的高通量处理。由于移液步骤少，并且如果细胞在 96 孔板或 384 孔板中培养，则无需转移样品，裂解程序的经济性也非常高。高效的 SuperScript IV VILO 反转录预混液还能够转录最难转录（降解和低丰度）的 RNA，同时反应时间相比平常缩短 10 分钟。此外，TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒还兼容 70 多万种 TaqMan 基因表达检测试剂盒。 最大限度提高检测灵敏度 在某些竞品试剂盒中，细胞裂解物的含量不超过反转录反应体积的 10%；而在 TaqMan Cells-to-CT Express 试剂盒中，细胞裂解物可达反转录反应总体积的 45%。此外，cDNA 可达实时荧光定量 PCR 反应体积的 45%。在经过优化的反转录反应中加入大量裂解物，以及在使用 TaqMan Fast Advanced 预混液进行的后续实时荧光定量 PCR 反应中加入大量 cDNA，可最大限度提高灵敏度。预混液能够精确且准确地扩增靶标，从而检测少量靶标，例如表达水平低的转录物。 |
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