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标记钙指示剂是结合 Ca2+ 离子后荧光强度增加的分子。Fluo-3 应用在流式细胞分析上,如涉及笼状螯合剂光活化、第二信使和神经递质的实验以及细胞水平的药理学筛选,用于 Ca2+ 的空间动力学成像。Fluo-4 是 fluo-3 的类似物,其中两个氯取代基被氟取代,导致在 488 nm 波长处的荧光激发增强,因此荧光信号水平更高。将溶解后的指示剂直接加入含有培养细胞的培养皿中,即可向细胞上样 AM 酯形式的这类钙离子指示剂。这些指示剂适用于荧光和共聚焦显微镜、流式细胞分析和微孔板筛选应用。 钙指示剂(AM 酯)规格: •标签(Ca2+– 结合形式的激发/发射波长):Fluo-4 (494/506 nm) • 结合 Ca2+ 后荧光强度增加:>100 倍 • 缓冲液中 Ca2+ 的 Kd:∼335 nM • 结合 Ca2+ 后,荧光增加,波长稍有变化 使用 TPEN 控制重金属阳离子 此外,基于 BAPTA 的指示剂可结合各种重金属阳离子(例如 Mn2+、Zn2+、Pb+2),亲和力远高于 Ca2+。可以使用重金属选择性螯合剂 TPEN 来控制由这些离子引起的钙测量值扰动。 荧光钙指示剂的更多选择 我们提供大量的 Molecular Probes™ 钙指示剂供各种实验场景选择使用。更多信息请参阅《Molecular Probes™ 手册》中的可见光激发的荧光 Ca2+ 指示剂—第 19.3 节。 对于 UV 激发的 Ca2+ 指示剂、基于蛋白的 Ca2+ 指示剂、Ca2+ 指示剂的偶联物以及其他金属离子(即 Mg2+、Zn2+)的荧光指示剂,请查看 Molecular Probes™ 手册中的 Ca2+、Mg2+、Zn2+ 以及其他金属离子指示剂—第 19 章。 |
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